مقدمة عن طريقة حفظ الفيروسات المبردة بمضادات-.

تحتاج العديد من الكائنات الحية الدقيقة إلى الحفظ في درجة حرارة منخفضة، لذا فإن طريقة الحفظ في درجة حرارة منخفضة جدًا-هي مجموعة واسعة من طرق الحفظ الميكروبي. يمكن عادةً تخزين الميكروبات التي تتطلب عناصر غذائية معقدة، مثل تلك التي لا يمكن الحفاظ عليها نشطة بواسطة طرق تخزين أخرى (مثل الفطريات المسببة للأمراض النباتية)، في درجات حرارة منخفضة جدًا- (ATCC1983; Halliday, Baker 1985).

تتمثل هذه الطريقة في تجميد الخلايا في أنابيب صغيرة أو أمبولات بمعدل تجميد أبطأ (1 ج/دقيقة) حتى -150 درجة مئوية، ثم تخزين هذه الأنابيب الصغيرة في النيتروجين السائل عند درجة حرارة -150 إلى 196 درجة مئوية. تختلف عوامل الحماية من التجميد ذات درجة الحرارة المنخفضة للغاية عن تلك المستخدمة في التجفيف بالتجميد. يستخدم ATCC عادةً خليطًا مصنوعًا من الجلسرين (10%) والميتفورمين (5%) وسائل الاستنبات للحفاظ على معظم خطوط الخلايا. تدخل هذه المواد الكيميائية إلى الخلية لتجنب الضرر المتجمد للبطانة. يجب التعامل مع الخلايا المخزنة في حاويات مبردة بعناية عند الإنعاش. عندما يتم تسخين الأنبوب، تقتل بلورات الثلج الناتجة الخلايا ويمكن تجنب الحادث عن طريق التشغيل السليم.

طالما يتم إذابة العينة بسرعة لتقليل فقدان الحيوية، فإن الممارسة هي: وضع الأنبوب الصغير المغلق بسرعة في ماء بدرجة حرارة 37 درجة مئوية، حتى يذوب كل الجليد، ثم يفتح الأنبوب، وتنقل المحتويات إلى الوسط. يجب دائمًا تخزين الميكروبات التي يتم الاحتفاظ بها في درجات حرارة منخفضة جدًا- في بيئات ذات درجات حرارة منخفضة جدًا، لذلك يلزم وجود خزانات النيتروجين السائل. يجب إيلاء اهتمام منتظم لإعادة ترطيب النيتروجين السائل أثناء التخزين-على المدى الطويل. يتطلب هذا النوع من التخزين تمويلًا أكبر من التمويل-التجفيف بالتجميد، بما في ذلك العمالة والنيتروجين السائل، وهو أمر ضروري للحفاظ على درجات حرارة التخزين.